懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞復(fù)蘇操作大不同細(xì)節(jié)決定細(xì)胞存活率

貼壁細(xì)胞復(fù)蘇核心流程

1、快速解凍：凍存管37度水浴1分鐘內(nèi)wan全融化，避免DMSO損傷細(xì)胞

2、離心清洗：轉(zhuǎn)移至含培養(yǎng)基的離心管，1000rpm離心5分鐘，棄上清去除凍存液

3、重懸貼壁：用預(yù)熱培養(yǎng)基重懸，接種至培養(yǎng)瓶，搖勻后靜置培養(yǎng)，24小時后觀察貼壁情況

懸浮細(xì)胞復(fù)蘇更靈活

1、直接復(fù)蘇法：解凍后可直接將細(xì)胞懸液加入新鮮培養(yǎng)基，無需離心（敏感細(xì)胞建議使用離心法，避免DMSO對細(xì)胞的損傷

2、離心法：若需換液，低速離心（300-800rpm)后重懸，避免機(jī)械損傷

 貼壁VS懸浮復(fù)蘇差異

貼壁細(xì)胞：必需離心去除凍存液，依賴貼壁生長，復(fù)蘇后恢復(fù)期長

懸浮細(xì)胞：可免離心直接培養(yǎng)，恢復(fù)快但需維持密度，避免頻繁觀察（敏感細(xì)胞仍建議使用離心法，避免DMSO對細(xì)胞的損傷）

無論哪種細(xì)胸，快速解凍、無菌操作和培養(yǎng)基預(yù)熱都是關(guān)鍵